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安田, 正昭 ; 加藤, 義男 ; 石川, 達 ; 多和田, 真吉 ; 小波本, 直忠 ; 当山, 清善 ; Yasuda, Masaaki ; Kato, Yoshio ; Ishikawa, Satoshi ; Tawata, Shinkichi ; Kobamoto, Naotada ; Toyama, Seizen
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.135-141,  1993-12-01.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/3799
概要: Monascus属菌は中国では紅酒,紅腐乳の製造に,沖縄ではとうふようの製造に用いられる産業上重要な麹菌である。Monascus属菌を蒸米に生育させた紅麹はデンプンをグルコースに,たん白質をペプチドやアミノ酸などに変換する酵素源として重要で ある。特に,同麹菌の産生するプロティナーゼはとうふよう熟成の鍵酵素として重要な役割を担っている。たん白質を原料とする発酵食品の開発に資する目的で,本研究においては固体培養法により調製した紅麹中のプロティナーゼ活性の高い菌株のスクリーニングを行った。その結果,本酵素活性の高いMonascus pilosusを選抜した。選抜菌株の産生する本酵素の反応最適pHは2.5付近,反応最適温度は50℃であった。本酵素は50℃,10分間の処理でpH3.0∿6.0の範囲内で安定であった。また,熱安定性は55℃であった。本酵素はヒトヘモグロビン,ミルクカゼイン,牛血清アルブミン及び分離大豆たん白質等によく作用したが,β-ラクトグロブリン及びゼラチンには全く作用しなかった。本酵素反応はペプスタチンにより顕著に阻害された。
The screening was carried out to find Monascus fungus that would produce a high activity of the acid proteinase to be used for making fermented protein foods. Monascus pilosus was found to have the highest activity of the enzyme which was formed by solid state culture. Properties of the enzyme were investigated. The optimum pH was around 2.5 and the optimum temperature was 50℃. The enzyme was stable during a 10-min treatment at 50℃ in a range of pH 3.0∿6.0 and was still stable up to 55℃. The enzyme was active on human hemoglobin, milk casein, serum albumin, and isolated soybean protein. However, the enzyme was not active on β-lactogloblin, and gelatin. The enzyme was markedly inhibited by pepstatin.
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安田, 正昭 ; 奥浜, 真時 ; 坂口, 真樹 ; 小波本, 直忠 ; Yasuda, Masaaki ; Okuhama, Shinji ; Sakaguchi, Maki ; Kobamoto, Naotada
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.135-142,  1992-12-01.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/3818
概要: とうふようの製造で,豆腐の乾燥工程は微生物による前発酵として意義づけられ,特に,細菌の生産する大豆たん白質分解酵素はその重要な鍵を握っている。本研究においては,各種細菌における大豆たん白質分解活性の高い菌株のスクリーニングを行い,本酵素活性 の高い菌株の培養条件を検討した。その結果,大豆たん白質分解活性の高い細菌TYO-67菌が選抜された。本菌は好アルカリ性のBacillus属細菌であると同定された。本酵素生産のための供試細菌の最適培養条件は,分離大豆たん白質(SPI, 2%)及びグルコース(0.2%)を含む培地(pH 11.5∿12.5)で30℃,48時間振とう培養することに設定された。培養ろ液から,硫酸アンモニウム塩析(80%飽和),DEAE-セルロース及びQAE-セファデックスA-50カラムクロマトグラフィーを行って得られた本精製酵素の反応最適pHは8.0∿9.5で,反応最適温度は50℃であった。
The production of the enzyme which hydrolyzed soybean protein was investigated with 18 strains of bacteria in the type culture collection, and 153 strains of bacteria were isolated from varieties of food such as tofu, tofuyo and others. The higest production of the enzyme was found in the culture broth of strain TYO-67. The organism was identified as bacterium belonging to the genus Bacillus. In order to find the medium conditions required for improvement of the enzyme production by this strain, the microorganism was grown in the medium containing soy protein isolate (SPI). The best enzyme production was obtained when the organism was grown in the medium (initial pH 11.5-12.5) containing SPI (2%) and glucose (0.2%) at 30℃ for 48 hr under aerobic conditions. The enzyme had the maximum reactivity at 8.0-9.5 and 50℃.
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小波本, 直忠 ; Kobamoto, Naotada
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.129-138,  1980-11-29.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4093
概要: 全トランスーレチナールと20種のアミノ酸の付加反応は, 50%エタノール水中で行なわれ, その結合定数と生成物のモル吸光係数を求めた。使用したアミノ酸の中で, アミノ基のpK値の高いL-オルニチン, L-リジン, 及びβ-アラニンが高い結合 定数を与えた。このことから, アミノ酸系の食料起源の昆虫視覚阻害剤の分子レベルに於けるスクリーニングには, レチニリデン化合物形成反応の結合定数と共に, 反応に関与するアミノ基のpK値が指標となり得ることが示された。アニリン及びヒドロキシルアミンについても, 結合定数と反応生成物のモル吸光係数を求めた。L-リジン, アニリン, 及びヒドロキシルアミンが, 適切な条件下で, 全トランスーレナチール脂質二重膜の光電位発生に影響を及ぼすことを認め, 同膜系が, アミノ基を持つ昆虫視覚阻害剤のスクリーニングに利用できることが示された。
The production and some properties of the enzyme hydrolyzing the hemicellulose of sugar-cane bagasse by Streptomyces sp. were described. The production of the enzyme was investigated with 162 strains of the actinomycetes isolated from soils of sugar-cane fields in Okinawa. The highest production of the enzyme was found in the culture fluid of Streptomyces sp. No. 131. In order to find the medium conditions required for the improvement of the enzyme production by this strain, the organism was grown in the medium containing the hemicellulose of sugar-cane bagasse. The best enzyme production was obtained when the organism was grown in the medium (initial pH 8.5) containing the hemicellulose (2%) at 30℃ for 72hr under aerobic conditions. When the hemicellulose of sugar-cane bagasse was hydrolyzed with the hemicellulase, oligo saccharide of xylose and xylose were liberated. The enzyme had the maximum reactivity at about pH 7.5 and 50℃ for the hemicellulase reaction.
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小波本, 直忠 ; Kobamoto, Naotada
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.139-147,  1980-11-29.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4094
概要: 染料視覚阻害剤を開発する目的で, 13種の澱粉, 3酸性染料, 3塩基性染料, 及び3両性染料を用いて, 澱粉粒への染料吸着を調べた。染料吸着量は, 塩基性染料>酸性染料>両性染料であった。酸性染料中, 小径澱粉粒が大径澱粉粒より高い吸着を 示した。陽イオンの染料吸着に与える影響は, 二価が一価より高かった。イオンの高濃度(イオン強度0.1)では, 酸性染料及び塩基性染料の吸着は低下したが, 両性染料は, 特定の澱粉については増加を示した。全澱粉について, メタノール中での吸着は, ほぼ零に近かった。メタノール, エタノール, プロパノール, 及びブタノール中での溶媒蒸発法による吸着では, メタノールとエタノールが高く, プロパノール, 次にブタノールの順に低下した。メタノール蒸発法による染料吸着は, 水溶液中の吸着より高かった。塩基性染料及び両性染料は, 澱粉粒径が大となるに従い吸着量が高かった。これらの現象を説明するために, 澱粉粒の表面及び内部に於けるイオン結合形成の可能性が提案された。
In order to develop dye vision-inhibitor, dye adsorption onto starch granules was studied using 13 starches, 3 acidic dyes, 3 basic dyes, and 3 amphichroic dyes. The amounts of dye adsorption were in the order of basic dyes> acidic dyes> amphichroic dyes. Among acidic dyes, small size starches gave a greater adsorption than large size starches. The effect of cations was greater with divalent ions than monovalent ions. At a higher ionic concentration (0.1 M), the adsorption of acidic dyes and basic dyes decreased while that of amphichroic dyes increased for some starches. Onto all starches, the amount of dye adsorption in methanol sulutions was about nul. When a solvent-evaporation method was applied to methanol, ethanol, propanol, and butanol solutions, dye adsorption was greater in methanol and ethanol and decreased as the number of carbons increased. Dye adsorption onto starches in methanol solutions with the solvent-evaporation method was generally greater than that in aqueous solutions. It was also shown that the adsorption of basic dyes and amphichroic dyes increased as the size of starch granules increased. The involvement of ionic bond formation at not only granular surface but also the inner phase of starch granules was proposed for the explanation of the results observed.
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小波本, 直忠 ; 当山, 勝 ; 清水, 俊秀 ; Kobamoto, Naotada ; Toyama, Masaru ; Shimizu, Toshihide
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.149-154,  1980-11-29.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4095
概要: 琉球諸島に在るクワズイモ, Alocasia odora C.Koch(Araceae), の農薬製剤化への利用を考え, 茎の化学的組成, 澱粉, 及び針状刺激物質について調べた。クワズイモの茎は水分含量が高く, 95.5%に達した。澱粉含 量は, 新鮮物では1.59%であったが, 風乾物での澱粉価は40.42%であった。澱粉粒は球形で, その粒径は1.6∿4.2μであった。水及び50%エタノール水で抽出され得る糖の中で, グルコースとフラクトースがペーパークロマトグラフ法で検出された。クワズイモの茎から澱粉を調製する際に, 刺激性を有する針状結晶が澱粉と共に沈澱したが, 各種希酸で処理することにより除去できることが示された。針状結晶は, 長さが約40μで太さは約3.5μであった。針状刺激性物質は, 加熱及び乾燥によっても効力を失わなかったことから, 加害性昆虫や他の動物に対する忌避性物質として利用され得る可能性が示された。
The chemical composition, starch, and raphides of the stem of Alocasia odola C. KOCH (Arceae) were investigated in order to utilize the unused natural resource habitated in the Ryukyu Islands for the purpose of pesticide formulations. The stem moisture was as high as 95.5%. The starch content of a fresh sample was 1.59% while that of an air-dry sample was 40.42%. The starch granule of the stem was spherical with a diameter of 1.6-4.2μ. The presence of glucose and fractose in water and 50%-ethanol extracts was shown by paper chloratographic methods. The irritant raphides which precipitated along with starch granules could be removed by solvilization with dilute acid treatments. The size of the raphides was about 40μ in length and about 3.5μ in width. Since the raphides did not lose irritant activities by drying and heating, the bioactive substances were suggested to be used as possible plant protectants against noxious animals.
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小波本, 直忠 ; 玉城, 香子 ; Kobamoto, Naotada ; Tamaki, Kaori
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.155-161,  1980-11-29.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4096
概要: 食料起源の昆虫視覚阻害剤の迅速な生化学的スクリーニングに応用する目的で, ウリミバエ頭部から抽出された主な水溶性色素を一回のクロマトグラフィにより分離する方法を確立した。ウリミバエ頭部(2,000)からM/30(pH7.0)リン酸緩衝液で得 た抽出物のセファデックスG-15カラムクロマトグラフィにより小分子色素が6種(P-I∿P-VI)存在することが認められた。P-IからP-IIIは, 近紫外部に吸収帯を持ち, P-IVからP-VIは, 可視光線を吸収した。P-IVを除いて, 全色素が特異的な蛍光を発した。得られた6色素中, P-III, P-IV, 及びP-VIは光感受性を示した。P-VIのみは, 白色光で退色すると共に, 近紫外部に新しい吸収帯を形成した。これらの結果により, 本分離法が, スクリーニングに利用できることが示された。
For the purpose of application to rapid biochemical screening of the insect-vision inhibitors derived from agricultural food products, single chromatographic process for separation of the major water-soluble pigments extracted from the heads of the melon fly, Dacus cucurbitae COQUILLETT, was established. The existence of six small-molecular weight pigments (P-I-P-VI) were confirmed on Sephadex G-15 column chromatography of an extract with M/30 (pH 7.0) phosphate buffer from the insect heads. The fractions P-I through P-III had absorbance peaks at the near UV region while P-IV through P-VI were capalbe of absorbing visible light. Except P-IV, all pigments emitted distinct fluorescence. The fractions P-III, P-IV, and P-VI were photosensitive. Only P-VI formed the new absorbance maximum at the near UV region by bleaching with white light. From these results, it was suggested that the present separation procedure would be used for screening purpose.
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小波本, 直忠 ; Kobamoto, Naotada
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.135-141,  1979-12-11.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4153
概要: モモアカアブラムシのカラシナ葉面上の色覚に基づく定着性は, 吸収極大を500∿600nmに持つ各種色素(アントシアン類, 食品着色料, 及び染料を含む)の存在により著しく低下し, 500nm以下では, 逆に増加した。定着性は, また , 波長425nmにおける吸光度の最大吸収波長における吸光度に対する比率が低い程低く, 25%以下で最小値を示した。定着性は, さらに, 555nmの吸収極大における吸光度が高い程低く, その関係は, log(定着性)=2-a(OD)であった(但し, aは定数)。定着性を低下させる赤紫色色素は安全な虫害予防用忌避剤として使用できること, 使用した色素中のアントシアン系色素は, 植物にとって, 食植性昆虫に対する抵抗性を示す物質であること, さらに, これらアントシアン類の農薬としての利用は, 農産製造における一目標となり得ることを示した。
The color-vision dependent arrestivity of Myzus persicae SULZER on the green leaf of the leaf mustard was extremely decreased by the various pigments, including anthocyans, food colorlants, and dyes, whose absorbance peaks were in a range of 500-600nm and was increased by the pigments whose absorbance peaks were at 500nm or shorter. The lower values in the ratio of absorbance at 425nm to that at the absorbance peak gave lower values in the arrestivity. The minimum arrestivity was observed at the ratio of 25% or lower. The arrestivity decreased with increasing absorbance at the absorption peak of 555nm. The relationship was expressed as log (arrestivity)=2-a(OD), where a was a constant. It was proposed that the red-purple pigments, by lowering the arrestivity, would be used as the safe repellents for preventing insect attacks, anthocyans would function as a resistant factor of plants against attacks by phytophagous insects, and pesticidal usage of the anthocyans would be developed as one of the economical aims of agricultural food processing.
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小波本, 直忠 ; Kobamoto, Naotada
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.143-150,  1979-12-11.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4154
概要: 脂質二重膜における食料起源農薬の作用の定量的評価法を開拓するため, 分光学的方法によりエタノールー酢酸緩衝液系(0.2M, pH5), および, 光電位測定法により脂質二重膜系で, テトラクロルー1,4-ベンゾキノン(クロラニル)の全トラン スーレチナール(組成比1 : 1)との電荷移動錯体(CTC)形成を検討した。このCTCは, 溶液系で, 結合定数が2.6×10^5l/M, CT-帯のエネルギーが2.76eVで, 吸光係数が7450l/Mcmであった。全トランスーレチナールのイオン化ポテンシャルは8.47eVであり, 電位は, クロラニル存在下で, 570%まで増加した。この増強効果は, 結合定数が1.1×10^5l/MのCTCを膜表面において全トランスーレチナールと形成することによるものと考察した。この膜系が, エネルギー変換過程に作用する食料起源農薬のスクリーニング及びそれらの作用機構の解明に利用できることが提案された。
In order to develop the methods of quantitative evaluation of the action of food-originated pesticides on the bilayer lipid membrane, a charge-transfer complex (CTC) of tetrachloro-1,4-benzoquinone (chloranil) and all-trans-retinal (1 : 1 composition) was observed in ethanol acetate buffer (pH 5,0.2M) by a spectrophotometric method and in the membrane system by the method of photoelectric measurement. This CTC had an association constant of 2.6×(10)^5l/M, the energy of CT-band of 2.76eV, and an extinction coefficient of 7450l/Mcm in the solution system. The ionization potential of all-trans-retinal was evaluated as 8.47eV. The light-induced potential developed across the bilayer lipid membrane containing all-trans-retinal was enhanced up to 570% at the presence of chloranil. This enhancement effect of chloranil was disscussed as a result of formation of the CTC with all-trans-retinal at the membrane interface, whose association constant was determined as 1.1×110)^5l/M. It was proposed that the membrane system could be utilized for screening the food-originated pesticides acting on energy-transfer processes and for elucidating their action mechanisms.
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小波本, 直忠 ; 大城, 直子 ; Kobamoto, Naotada ; Oshiro, Naoko
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.151-158,  1979-12-11.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4155
概要: 膜で隔てた外室に電子受容体として塩化第二鉄を含む酢酸緩衝液(0.2M)中での全トランス-レチナール脂質二重膜は, 内室へのL-システインの添加により, 光電位の変化を示した。pH値が4.9以下では増強効果が認められ, 4.8において最高とな り, 一方, 4.9より高い領域では減少効果が認められた。前者の増強効果は, 光電位発生の主荷電体, ホール, に対するL-システインの酸化還元作用として説明された。後者の減少効果は, 界面における全トランス-レチニルチアゾリジン-4-カルボン酸形成の分光学的影響として説明された。この膜系は, 昆虫の視覚に作用する食料起源の農薬の作用機構の理解と共に, L-システインと同様に作用する視覚阻害剤のスクリーニングにも利用できることが示された。
The light-induced potentials of an all-trans-retinal bilayer lipid membrane were influenced by the presence of L-cysteine in the aqueous phase, 0.2M sodium acetate buffer, having an electron acceptor, ferric chloride, in the opposite aqueous phase separated by the membrane. In a pH range up to 4.9,an enhancive effect was observed with the maximum at 4.8,whereas in a pH range beyond 4.9 a reductive effect was observed. The former enhancive effect was explained as a redox-related effect of L-cysteine on the major charge carrier, hole, of the photopotentials observed. The latter reductive effect was explained as a spectrophotometric effect of formation of all-trans-retinyl thiazolidine-4-carboxylic acid at the membrane interface. This membrane system was presented to be used for screening the vision inhibitors acting in a way similar to L-cysteine as well as understanding the mechanisms of the action of these potential food-originated pesticides on the insect vision.
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小波本, 直忠 ; 大城, 直子 ; Kobamoto, Naotada ; Oshiro, Naoko
出版情報: 琉球大学農学部学術報告 — The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus.  pp.159-168,  1979-12-11.  琉球大学農学部
URL: http://hdl.handle.net/20.500.12000/4156
概要: 食料起源の農薬の一例としてのL-システインのモモアカアブラムシヘの投与による致死作用の機構を解明することを目的とした。その結果, L-システインの投与により, (1)趨光性の増強, (2)色覚の変革が起こり, (3)趨光性リズムの撹乱を経て , (4)運動量の増大による体液pHの低下を引き起こし, (5)体液色素の400∿500nmでの光透過度が増加し, 太陽エネルギーの光化学的作用により, 致死することが推測された。これに関与する色素は, 430nmに最大吸収を持つ一種の物質であることが示された。この色素の吸収スペクトルはpH依存性を有することから, 体内への太陽光の透過量を調節する役割を持つものと推測された。本研究で使用したL-システインを含めたアミノ酸は農産食料に広く存在するため, それらの適切な利用により, 安全性の高い農薬を開発することが可能になった。
The purpose of the present work was to elucidate the action mechanisms of L-cysteine, one of the possible food-originated pesticides, on Myzus persicae SULZER. The results indicated that L-cysteine administration resulted in (1) an enhancement in phototaxis, (2) modification of color vision, (3) disturbance of phototactic daily rhythm, (4) decrease in the pH value of the body fluid at the range of activities, and (5) an increase in light transmission of the pigment in the body fluid at the range of 400-500nm, lending an enhancement in photochemical reactions by the sun light and, finally, leading to the altimate mortality. The pigment involved in this secondary mortality was shown to be one pigment species having its absorption maximum at 430nm. Since the absorption spectrum of the pigment was pH dependent, the pigment was expected to play a role of controlling the transmission of the sun light into the body of the aphids. Having a wide distribution in the agricultural food products, amino acids, including L-cysteine used in this work, would be developed as highly safe pesticides by an appropriate use of them.
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